A = εlc 식으로 흡광도, 몰 흡광계수, 광경로 길이, 농도를 연결합니다. 흡광도로부터 시료의 농도를 구하거나, 농도를 아는 용액의 흡광도를 예측할 수 있습니다.
입력
측정된 흡광도 A로, 분광광도계에서 직접 읽는 무차원 양입니다. 흡광도 1은 빛의 90%가 흡수됨을, 흡광도 2는 99%가 흡수됨을 뜻합니다.
몰 흡광계수(몰 흡광도) ε로, 단위는 L·mol⁻¹·cm⁻¹입니다. 특정 파장에서 흡광 화학종이 빛을 얼마나 강하게 흡수하는지를 나타내는 고유한 성질입니다. 진하게 발색하는 색소는 100,000을 넘기도 합니다.
빛이 시료를 통과하는 거리로, 큐벳에 의해 정해집니다. 표준 큐벳의 광경로 길이는 1 cm입니다.
결과
값을 입력하면 계산 결과가 표시됩니다.
M
c = A / (ε × l)로 계산된 농도입니다. 보정된 분광광도계가 흡광도 측정값을 농도로 변환하는 방식입니다.
베르-람베르트 법칙 이해하기
베르-람베르트 법칙은 용액이 흡수하는 빛의 양을 그 안에 들어 있는 흡광 물질의 양과 연결합니다:
A=εlc
기호
물리량
단위
A
흡광도
무차원
ε
몰 흡광계수
L·mol⁻¹·cm⁻¹
l
광경로 길이
cm
c
농도
mol/L
흡광도는 시료에 들어가고 나오는 빛으로부터 정의됩니다: . 흡광도 1은 시료가 빛의 10분의 1을 투과시킴을, 흡광도 2는 100분의 1을 투과시킴을 뜻합니다.
예제
어떤 발색 착물의 흡광 최대 파장에서 몰 흡광계수가 ε = 5,000 L·mol⁻¹·cm⁻¹입니다. 표준 1 cm 큐벳에서 흡광도가 0.75로 읽혔습니다. 농도는 얼마일까요?
c=εlA=5000×10.75=1.5×10−4mol/L
반대로, 같은 큐벳에 들어 있는 같은 착물의 2 × 10⁻⁴ mol/L 용액은 다음만큼 흡수합니다:
A=εlc=5000×1×2×10−4=1.0
법칙이 선형인 이유
용액의 얇은 층 하나하나는 통과하는 빛의 일정한 비율을 제거합니다. 로그를 취하면 이 반복된 곱셈이 단순한 합으로 바뀌는데, 그래서 투과도가 아니라 흡광도가 농도와 광경로 길이에 정비례하여 증가하는 양이 됩니다. 농도를 두 배로 하면 흡광도가 두 배가 되고, 큐벳 길이를 두 배로 하면 또 두 배가 됩니다.
흡광도에서 농도 읽기
정량 분광광도법은 이 법칙을 거꾸로 적용합니다. 분석자는 교과서의 단일 ε 값을 믿기보다 보통 농도를 아는 여러 표준 시료를 준비하여 각각 측정하고, 흡광도를 농도에 대해 도시합니다. 그 검량선의 기울기가 ε × l과 같으며, 미지 시료의 농도는 그 흡광도로부터 직선에서 읽어 냅니다.
흡광도
투과된 빛
0.1
79%
0.3
50%
1.0
10%
2.0
1%
법칙이 깨질 때
베르-람베르트 거동은 용액이 묽을 때, 대체로 흡광도 약 1 이하에서만 신뢰할 수 있습니다. 더 높은 농도에서는 흡광 분자끼리 상호작용하기 시작하고 국소 굴절률이 변하여 검량선이 직선에서 벗어나 휩니다. 산란광이나 완전한 단색이 아닌 광선 같은 기기적 효과, 그리고 해리나 형광 같은 화학적 변화도 추가적인 편차를 만듭니다. 실용적인 해결책은 흡광도가 기기의 선형 영역(대략 0.1~1.0)에 들어올 때까지 시료를 희석하는 것입니다.
자주 묻는 질문 (FAQ)
베르-람베르트 법칙이란?
베르-람베르트 법칙은 흡광도가 농도에 비례한다는 법칙입니다: A = ε × l × c. 여기서 A는 흡광도(무차원), ε는 몰 흡광계수(L·mol⁻¹·cm⁻¹), l은 광경로 길이(cm), c는 몰 농도(mol/L)입니다. 세 인자가 곱해지므로 농도나 광경로 길이 중 하나를 두 배로 하면 흡광도도 두 배가 됩니다. 이 법칙은 시료가 빛을 얼마나 흡수하는지로 농도를 측정하는 정량 분광광도법의 기초입니다.
몰 흡광계수(ε)란?
몰 흡광계수는 몰 흡광도라고도 하며, 특정 파장에서 화학종이 빛을 얼마나 강하게 흡수하는지를 나타냅니다. 단위는 L·mol⁻¹·cm⁻¹입니다. ε가 크면 묽은 용액도 빛을 강하게 흡수합니다. 발색하는 유기 색소나 전이금속 착물은 수만 단위의 ε 값을 가지는 경우가 많고, 흡광이 약한 물질은 ε가 몇에 불과합니다. ε는 파장에 따라 달라지므로 항상 특정 파장 λ(보통 흡광 최대 파장 λmax)에 대해 제시됩니다.
베르-람베르트 법칙은 언제 깨지는가?
이 법칙은 흡광도가 농도에 따라 선형으로 증가한다고 가정하며, 이는 묽은 용액(대체로 흡광도 약 1 이하)에서만 성립합니다. 고농도에서는 흡광 분자끼리 상호작용하고 굴절률이 변하며, 산란광이나 단색성이 떨어지는 광선 때문에 검량선이 휩니다. 회합, 해리, 형광 같은 화학적 효과도 선형성을 깨뜨립니다. 정확한 측정을 위해서는 흡광도가 기기의 선형 범위(대체로 0.1~1.0) 안에 들도록 시료를 희석합니다.
흡광도로부터 농도를 어떻게 구하는가?
A = ε × l × c를 c = A / (ε × l)로 정리합니다. 흡광도를 측정하고, 해당 파장에서 화학종의 알려진 몰 흡광계수를 이용하여 ε와 큐벳의 광경로 길이로 나눕니다. 예를 들어 1 cm 큐벳에서 ε = 5,000 L·mol⁻¹·cm⁻¹인 화학종의 흡광도가 0.75이면 c = 0.75 / (5,000 × 1) = 1.5 × 10⁻⁴ mol/L입니다. 실제로는 단일 ε 값보다 여러 표준 시료로 만든 검량선을 사용하는 것이 바람직합니다.